改性磷脂HPLC法常用的检测器有发表时间:2024-11-25 13:08 改性磷脂HPLC(高效液相色谱)法常用的检测器主要包括以下几种: 紫外检测器(UV): 紫外检测器是HPLC中应用最广泛的检测器之一,对占物质总数约80%的有紫外吸收的化合物均有响应。 由于磷脂中存在碳碳双键、羰基、磷酸基团、氨基等不饱和基团和官能团,使其在200nm~214nm下有强吸收,因此紫外检测器在改性磷脂的分析中得到了广泛应用。 紫外检测器具有灵敏度高、线性范围宽、噪声低等优点,适用于梯度洗脱,检测后不破坏样品,可用于制备,并能与任何检测器串联使用。 蒸发光散射检测器(ELSD): 蒸发光散射检测器是一种高灵敏度、通用型检测器,尤其对一些较难分析的样品,如磷脂、皂苷、生物碱、甾族化合物等无紫外吸收或紫外末端吸收的化合物具有优越性。 它的工作原理是将流动相喷入有热气流的检测器中,流动相蒸发而不挥发性的脂质形成微小液滴。这些液滴散射照向光电倍增器的光,引起电流的变化,根据脂质的量不同电流的大小也不同,从而达到检测的目的。 ELSD操作简便,可以与任何品牌的HPLC系统连接,且对流动相的组成不敏感,可以用于梯度洗脱。 改性磷脂示差折光检测器(RID): 示差折光检测器是一种浓度型通用检测器,对所有溶质都有响应,基于连续测定样品流路和参比流路之间折射率的变化来测定样品含量。 某些不能用选择性检测器检测的组分,如高分子化合物、糖类、脂肪烷烃等,可用示差检测器检测。 但需要注意的是,示差折光检测器对温度变化非常敏感,因此检测器必须恒温才能获得精确的结果。此外,它也不能用于有梯度洗脱的HPLC分析。 荧光检测器(FD): 荧光检测器是一种高灵敏度、有选择性的检测器,可检测能产生荧光的化合物。 某些不发荧光的物质可通过化学衍化生成荧光衍生物,再进行荧光检测。 荧光检测器的灵敏度通常比紫外检测器高约两个数量级,但其线性范围不如紫外检测器宽。 在实际应用中,需要根据改性磷脂的具体性质和分析要求选择合适的检测器。同时,还需要注意检测器的操作和维护,以确保分析结果的准确性和可靠性。 |